更新時間:2021-07-02
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檢測原理
☆ 本實驗采用雙抗體夾心ELISA法,所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。
☆ 預先包被的抗體為單克隆抗體,檢測相抗體為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標記。
☆ 樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。
☆ 隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應,經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。
☆ TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。
☆ 顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
檢測原理示意圖如下:
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子ELISA檢測試劑盒樣本的稀釋
① 樣本稀釋倍數(shù)的確定:
本試劑盒可檢測SOD抑制率范圍在10%-50%之間,抑制率范圍25%-45%。
SOD抑制率(%)=((A對照-A對照空白)-(A測定-A對照空白))/(A對照-A對照空白)× 100% =(A對照-A測定)/(A對照-A對照空白)× 100%
② 樣本稀釋倍數(shù)的選擇:
在正式檢測前,需選擇2-3個預期差異較大的樣本稀釋成不同濃度,按操作表進行預實驗,確定稀釋倍數(shù)。
③ 樣本稀釋倍數(shù)的調(diào)整:
若SOD抑制率大于50%,需將樣本稀釋后再測試;若SOD抑制率小于10%,減小稀釋倍數(shù)后再測試。
注:稀釋液為PBS(0.01 M,pH 7.4)。
儲存方法:
可以存儲在2 - 8°C長達1個月(專家建議:4°C恒溫保存,酶免試劑盒實驗效果更佳)。對于長期存儲,請在-20°C的存儲,盡量保持試驗板在密封鋁箔袋,避免潮濕。
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制試劑盒成本,并可提供免費代測。
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子ELISA檢測試劑盒實驗所需自備物品
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)。
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL。
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水。
4. 吸水紙。
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