我公司技術(shù)員根據(jù)自身多年【ELISA試劑盒實驗】經(jīng)驗,整理出的ELISA操作技巧。下面我們一起來看下具體內(nèi)容,你未必知道的12條ELISA實驗秘訣:
1.ELISA試劑盒實驗洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
2.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。
3.用戶在初次使用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
4.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
5.要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時,lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。
6.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
7.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。
8.將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會自然流下去。吸入液體時的的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。
9.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
10.實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只要取出所需量。
11.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗證。
12.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
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