ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中難免會出現(xiàn)錯誤,實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想也時有發(fā)生,遇到這樣的事情不要慌張,盡量找出解決問題的方法,今天就讓上海通蔚與您一起分享一下有哪些原因會使ELISA實(shí)驗(yàn)的結(jié)果不理想,和常見的解決方案。
一 生物實(shí)驗(yàn)室的污染
生物實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的廢液污染主要是化學(xué)性污染和生物性污染,另外還有放射性污染。我們經(jīng)常認(rèn)為實(shí)驗(yàn)室中的有機(jī)試劑并不直接參與發(fā)生反應(yīng),僅僅起溶劑作用,因此就直接把消耗的有機(jī)試劑以各種形式排放到周邊的環(huán)境中,排放總量大致就相當(dāng)于試劑的消耗量,然而日復(fù)一日,年復(fù)一年,這樣累積下來的排放量就十分可觀了。
二 ELISA試劑盒花板現(xiàn)象
關(guān)于ELISA試劑盒結(jié)果“花板"的問題對檢測數(shù)據(jù)造成了很大影響,往往會使檢測者做出誤判,是實(shí)驗(yàn)中必須要注意和避免的。
針對這種“花板"現(xiàn)象我們通過多次實(shí)驗(yàn)的分析和判斷,總結(jié)了一些經(jīng)驗(yàn),分析如下:
1 標(biāo)本、試劑、儀器
1.1 標(biāo)本 出入境人員的血液標(biāo)本。
1.2 試劑 HBsAg、HCV、HIV、梅毒試劑均為不同廠家的ELISA試劑盒。
1.3 儀器 LD4-2型腦心機(jī)BID RAD1575型洗板機(jī)BID RAD550酶標(biāo)儀。
2 方法
所有被檢出入境人員的血液標(biāo)本,按照各個廠家提供的ELISA試劑盒說明書進(jìn)行HBsAg-HCV-HIV梅毒等檢驗(yàn)項(xiàng)目操作。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。
3 結(jié)果
所使用不同廠家的試劑有時會出現(xiàn)“花板"問題。
4 分析
在所有標(biāo)本進(jìn)行檢測的過程中,所用的儀器及加樣過程都處于正常狀態(tài)的情況下,步驟均按照各種試劑說明書的要求去做,排除實(shí)驗(yàn)所用儀器和操作步驟對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響外,ELISA試劑盒內(nèi)的空白、陰性和陽性對照以及室內(nèi)質(zhì)控值都很正常,只有檢測的血液標(biāo)本情況異常。根據(jù)國家和疾控中心報告陽性率的比例不應(yīng)該是很高的情況下,HBsAg在用ELISA之前都經(jīng)過了快速金標(biāo)試劑的檢測,陽性標(biāo)本得到了一定的控制。因此,原因可能是在標(biāo)本的處理,特別是放置時間、離心速度和離心時間方面的問題。所以,標(biāo)本的處理就成為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的主要可疑因素。
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