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ELISA試劑盒挑選信然有辦法
更新時間:2014-02-18   點擊次數:941次

下面談一下怎樣靈活應用ELISA這個檢測方法以及怎樣去挑選ELISA試劑盒。ELISA這個方法的原理,大家都很明白,網上的資料很多。可真正用起來的時候,偶然間就會有點犯糊涂,我談一下自己的理解。
1、有些客戶會用OVA(卵清卵白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,然后會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清內里IgG,IgE等指標。當客戶向我咨詢購置這幾個指標的試劑盒的時候,我很肯定地說這些指標的檢測要你自己特制,不會有商品化的試劑盒出售的。當你baidu一下時,頁面出來大量的商品化的試劑盒,千篇一律的明書時候,我真的是蒙了,我懷疑自己跟不上時代了。我不去評論這些試劑盒的真假,我仍舊建議做這些檢測指標的朋友,選擇sigma公司V級別的OVA,然后用這個來造模,自己包板摸條件,用OD值來比較抗體含量的變化。
2、NO的檢測,一般都是采用經典的Greiss法,如今市場上竟然有NO ELISA試劑盒,真是徹夜未眠也搞不明白。另外還有做氧化應激指標MDA的檢測,我還是推薦各位用碧云天或者進口的檢測試劑盒,而不是ELISA試劑盒。
3、ELISA檢測方法簡單,靈敏度高,我個人認為ELISA檢測血清或者培養上清的細胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測;病原體抗原的定性與定量;評估自己制備的血清抗體的效價等。很多客戶有個誤區,拿來一個指標就想當然地嘗試用ELISA去檢測,我還是建議多動腦,該檢測活性的檢測活性,該做western的做western。
4、對付胰島素的檢測,我還是推薦millpore 旗下LInco公司的檢測試劑盒,不管是放免還是ELISA,據說權在他們手中。 zui近看了資料,瑞典Mercodia公司的胰島素檢測試劑盒也是得到市場的承認的。對付ox-ldl的檢測,Mercodia公司也是很牛的。
5、對付一些小分子的檢測,例如:前線腺素、糖皮質激素的檢測,我的理解是要用競爭法ELISA去檢測,也要購買采用這個方法的盒試劑盒。ELISA試劑盒一般細胞因子的檢測,都是采用常規的夾心法ELISA檢測,由于因子分子量比力大,一般10幾個KD左右,很容易找到兩個或多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不通的表位,也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結合小分子并固相化。解決方案便是酶標板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標的小分子,然后加樣品,再加不帶標志的檢測抗體,顯色底物。樣品的目標小分子的含量越高,吸光度越低。
 

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